微量型簡單、快速的換液濃縮裝置， 初始樣品10 cc至最終0.5 cc以下的新方法Hollow Fiber
但需配合特殊幫浦與最低處理量的要求，阻礙了樣品體積低於10cc以下的應用。
專利創新的微量型新設計
應用範圍
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提高 E. Coli細胞密度與增進蛋白質表現的關鍵因子
選對培養工具
耗氧菌的E. C oli，隨著細胞增生與密度增加，對氧氣需求也逐漸的拉高。因此於培養過程中，如何提升溶氧效率為重要因子之一。
Thomson的培養瓶(Ultra Yield Flask)的設計概念，即考量如何讓菌能長的好、長的多。長的好則需提升氧氣溶解率，因此設計培養瓶底部含六組檔板，強化液體擾流，進而大幅增加培養基與氧氣接觸表面積，以提高溶氧效率。另將瓶身做廣，做寬，用以提高培養體積。當培養體積增大，總細胞數相對增加，此時所需氧氣將會更多。因此將瓶口做大，並配合特殊的換氣膜，使培養瓶擁有更多的氣體交換率。
選對接種時間
利用製做一份生長曲線，了解微生物最適生長時期(對數期)的時間，並於該時期進行轉殖培養
選對表現條件
@ OD 600nm = 4時，此時約為微生物對數生長期的起始期，可開始進行佳誘導。並將培養溫度調降至18 ~ 25°C，震盪速度也調降至250 rpm 以下。約24小時後，即可收樣，然後您會發現結果確實與之前不一樣了。
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一張表看懂病毒濃縮方法病毒濃縮方法, 有採用傳統透析膜 (Dialysis Mambrane)方式, 最常用的則採用 離心管 (Spin Column). 而最近比較熱門與快速的則是採用 中空纖維膜 (Hollow Fiber) 處理.
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傳統透析
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離心分離
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中空纖維膜處理
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原理與方法 |
濃度差，產生自然對流滲透
利用透析膜內外之濃度差，以自然對流與滲透方式分離，於過程中外部之緩衝液需經常更換，以維持膜內外知濃度差異。
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以離心力，樣品經分子篩，以Dead End方式分離
起初樣品能順暢的經過分子篩分離出大小分子。但隨著大分子漸漸聚集，將分子篩塞住，小分子也就愈難能被分離出。
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同樣是利用分子篩分離，但採Cross Flow方式分離
樣品(大小分子)持續於中空纖維膜內流動，過程中小分子會順式經由分子篩流出，而其餘尚未被分離的大小分子仍會持續不停得流動，直至分離完成。 |
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處理時間 |
慢且耗時 通常需耗時二天二夜才能完成分離與換液。 |
稍快 但濃度越高離心時間越長 |
快
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操作手續 |
過程中需不斷的更換緩衝液，以維持一定的濃度差與透析效率。 | 無法執行連續式，每離心完一次，需添加新的緩衝液，再離心處理，反覆此過程。 |
可執行連續式換液與濃縮
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回收率 |
無法濃縮樣品，甚至透析過程中常是被稀釋 | 樣品易因膜的關係沾黏，而大幅降低回收率 | Recovery Rate > 98.5% |
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最低濃縮體積 |
樣品無法濃縮 | 無法預估與掌控 | 可設定最後濃縮體積，最小可達<0.5ml |
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無菌處理 |
不容易 | 不容易 | 可將相關管件先以 Auotclave 處理，全程於無菌操作台內進行換液與濃縮。全程無菌處理 |
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放大處理 |
無法處理較大量體積 | 較大體積需分管處理。若更大體積將無法處理 | 處理體積可由 1 ml ~ 數千公升均可 |
Note : Hollow Fiber 可選擇的 MWCO 相當密集且廣泛： 1; 3; 5; 10; 30; 50; 70; 100; 500; 750 kD; 0.1; 0.2; 0.65 u 等等
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快速簡單進行四氧化三鐵（Fe3O4）奈米透析(換液)
最新方法 :
Hollow fiber 中空纖維膜-切向流，快速濃縮透析系統 桌上簡易型!
50 分鐘後, 即可達 10x 濃縮並透析，完成離子分離換液
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令人折服的設計：INFORS Multitron震盪培養箱解析INFORS Multitron Standard震盪培養箱七大特殊設計，徹底改變了培養箱，不再是「占空間」、「小容量」與「噪音製造機」。另一重點是…..價格很親民。
1. 獨特的可程式溫度控制；可設定自動低溫誘導；應用於蛋白質表現後之自動低溫保存；或可設定延遲起動時間
2. 小體積大容量，一台抵三台，可疊放設計
3. 容量一樣大，最高操作高度僅為 130 cm
4. 最大轉速可達 400 rpm；振幅軸距有 25 與 50 mm，適合各種不同培養用途
5. 外拉式門板，免伸入手拿取；採用可水洗式甩尾王黏貼板，適用各種大小錐形瓶與鐵架，方便省空間
6. 懸吊式設計，於高震盪轉速下可自動維持設備的平衡，讓設備更加的安靜
7. 一體成形底部，拆卸保養清理容易，可直接以清水清洗內部
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「濃縮與透析」產程放大！從這二步驟開始……濃縮與過濾，二步驟……輕鬆放大製程
古早的過濾與濃縮
古早就有以膜方式進行濃縮的概念。如台灣有名的傳統小吃「紅龜粿」與常見的伴手禮「麻糬」，以前製作方式為利用麻袋（膜），以除去糯米水中的水分。至於製作量的多寡與所需時間長短的拿捏，則僅憑藉著師父個人經驗進行拿捏與判斷。
因應現代產品種類複雜與多樣化
常有客戶來電問「能處一噸的濃縮設備，需多少費用……..」。回答這個問題，事實上非常困難，因為現代產程所需處理的樣品種比傳統複雜、且多樣。產品特性因濃度、黏稠度的高低，都影響著過濾速度與所需花費的時間。較大系統式當然可應付，但需多大才足以應付產程所需呢？
另，也常有客戶會說「濃縮時間長短沒關係…..」。此問題也難以回答，因為中空纖維膜是沒有阻塞的問題，但膜面積卻與過濾效率息息相關。時間一拉長，如處理過程超過四~五小時以上，則產品很容易變質、變性。而多大的系統才能於五小時內完成呢？
可經由科學化二步驟，來評估系統之大小
步驟一： Pore Size與產品穩定度的評估
產品於進行量產前，建議可先取 50~500 ml樣品先進行小量的測試。利用 MicroKros 與 Midikros Hollow Fiber Module，配合 MAP System進行不同Pore Size的效率評估測試。同時檢視樣品於經中空纖維膜處理一段時間後，產品有否因而產生變異。
步驟二：量測Flux Rate與最佳之TMP
當通過步驟一的Pore Size與樣品穩定度測試後，可再利用MiniKros Sampler Hollow Fiber Module進行樣品1~3公升的先導型小量產測試。同時配合 "KR2i TFF System"，讓電腦自動演算出該Pore Size的Flux Rate與最佳之TMP條件。
進行量產系統評估
確定好膜的Pore Size，同時有獲得該Pore Size的Flux Rate與TMP相關條件與數據。此時使用者或業者僅需提供「未來產程所需的處理量」與「擬設定處理時間」，即可利用以上數據來進行合理化的線性放大評估。
優點
獲得高效益，降低成本
沒經過比較縝密的評估，而選用較大系統是可縮短處理時間，但過大的系統將使投資設備成本增加，未來更換所需耗材費用也較高。
提升產品品質，減少時間衝擊
Pore Size的選擇於濃縮分離上是一重要議題。過小Pore Size可提升樣品回收率，但處理時間相對的過長，品質不易掌控。而較大的Pore Size是可縮短處理時間，但是會導致產品回收率降低。
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浪漫優雅的 Spinner Flask…能讓細胞快樂生長的 Spinner Flask
規格
Double Arm Spinner Flask
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Order Number |
Working Volume |
Top Cap |
Arm Caps |
OD x H (mm) |
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SF-025 |
25 |
38 |
GL-18 |
38 x 122 |
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SF-050 |
50 |
38 |
GL-18 |
55 x 141 |
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SF-125 |
125 |
70 |
GL-32 |
70 x 135 |
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SF-250 |
250 |
70 |
GL-32 |
85 x 145 |
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SF-500 |
500 |
70 |
GL-45 |
110 x 90 |
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酒精是最常用的消毒劑，但不是想像中的那麼萬能……試試新一代的『福瑪斯達 D2』瑞士環安等級殺菌消毒劑
一般最範用與耳熟能詳的殺菌劑是 --- 酒精, 只有 75% 酒精具有殺菌功效的原理：
酒精濃度愈高與其殺菌效果並不是成正比。原因是高濃度的酒精，會讓細菌的外殼瞬間凝固，使表面蛋白變性，但酒精也因此沒辦法繼續深入細菌內部了，完全不具穿透力。換言之，菌體內部仍具有活力，無法完整殺死細菌。
經研究，酒精濃度只有於75%下是最適當，於此濃度下，不但可引起蛋白質變性，並具有穿透性特性，深入細菌內部，讓細胞脫水，凝固蛋白質，達到殺菌的效果。
但酒精殺菌的缺點不得不知：
75%酒精對於腸病毒、諾羅病毒，並無效用。因為這些病毒沒有脂質外殼，或是外殼比較厚，酒精也就無能為力了。 刺鼻，刺激皮膚 有時會傷害設備材質，如金屬、塑料、橡膠與壓克力等等。 於密閉空間噴灑，容易閃燃，密閉操作，極具危險性。
試試「福瑪斯達 D2」瑞士環安等級殺菌消毒劑的效用
殺菌功效
效能與時間
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Efficacy |
Conc. (2% ready-to-use solution) |
Time of reaction |
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Bactericide, fungicide (Candida) according to DGHM |
100% |
15 mins |
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Mycobacterium |
100% |
5 mins |
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Hepatitis B, HIV |
100% |
1 min |
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Rotavirus |
100% |
1 min |
適用
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【選擇CO2培養箱最常忽略，但卻是最需要注意的事項之一】濕度於二氧化碳培養箱上之重要性探討
基本要求：
二氧化碳培養箱功能乃是模擬生物體內的環境，進行細胞或組織的體外培養。因此培養箱最基本要求需能有穩定的溫度、CO2（以產生恆定的酸鹼值）與飽和濕度。
控制型態：
目前大多的二氧化碳培養箱於調節控制「溫度」與「CO2濃度」多屬於『強制調控型』，其回復速度與精準度均可到位。然而濕度則多是採用蒸發水盤式，讓濕度自然上升。並無調控，也沒任何顯式濕度呈現於控制錶上，屬於『自我調控飽和型』。
濕度的『自我調控飽和型』的缺失與影響：
當開啟二氧化碳培養箱取出細胞或組織進行檢測時，此時二氧化碳培養箱內之培環境已經瞬間消失。再度關閉二氧化碳培養箱後，溫度與 CO2 濃度可藉由強制控制方式，於短時間內可將溫度與 CO2 濃度回至控制點。
但濕度則是利用增濕盤利用自然蒸發作用，進行自我調控飽和方式回至飽和濕度，顯而易見，其恢復速度非常的慢。倘若飽和濕氣再於未能恢復時，又需再次開啟培養箱取樣檢測，此時飽和濕度將再次消失。濕度又得再利用自我蒸發方式重新達飽和溼度。此番來來回回將使培養基水分漸漸散失，培養基濃度因此漸漸提升，甚至有產生過度乾燥的可能，使細胞或組織的滲透壓力大增，導致培養不佳，也使重複性培養無法如預期。
改良方式
- 濕度採用 Innovative 「Direct Steam Humidification」Solution（DSH）強制控制型：
目前最新的方式為採用外掛式加濕器(DSH)。加濕水則儲存於 5或10公升血清瓶內，該儲水瓶預先進行滅菌處理，永遠保持於無菌狀態。培養箱內部則設有一濕度偵測器，當濕度低於設定值時，外掛式加濕器會引進外部無菌水至增濕槽，再由增濕槽進行二次加熱處理，此步驟二次菌水會瞬間蒸發成無菌水氣，引導入至培養箱內。
此方式可讓培養環境，快速恢復至最佳濕度狀態。且水源採用經二次滅菌處理步驟，可讓培養箱永遠保持於極度節淨的狀態。
- 培養箱設有內部強制氣流循環系統 :
增加一組內部氣流循環裝置，可使培養箱溫度、CO2濃度與濕度迅速達至最佳培養條件。大大降低環境變因所導致對細胞或組織衝擊的因子。
綜合概要
溫度、CO2 濃度與濕度為進行細胞或組織體外培養的重要控制條件，彼此關係缺一不可，尤其是濕度控制部分至為重要。濕度的高低，影響了培養基濃度與細胞/組織的耐受度。如何讓培養條件能有所控制、重複，且能實際有所依循，濕度的控制是完全不可忽略的一環。INFORS所設計的 Minitron 與 Multitron Cell 於門開啟關閉後於3分鐘內立即可回復至溫度、CO2 與濕度的最佳培養條件。
Find the right CO2 incubator for your lab:
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最新透析的技術與應用講求透析高回收率時，常常被忽略掉因素與方法
透析膜一是種半透膜，高濃度的小分子經由半透膜，往低濃度擴散，直至二端濃度達至平衡。進而再次更換新的外部透析液，繼續進行透析。持續幾次此步驟，即可將樣品小分子全數被透析出。因此透析膜的材質與透析膜孔徑的精細度影響透析效率甚巨。
CE (Cellulose Ester)膜
蛋白質對於膜的Binding程度為 CE < RC。而膜孔徑的專一性則為 CE > RC
透析膜一般最廣為人知的材質是RC (Regenerated Cellulose)，傳統的分子量(MWCO)可選擇範圍是 3.5；6~8 與 12~14kD (詳細規格可參閱 "欣梗-RC膜" 或 "SpectrumLabs-RC" )。
隨著材料科技發展，SpectrumLabs研發出讓 RC 膜的分子量(MWCO)可選擇性更多樣化，由1 kD, 2 kD, 3.5 kD, 8 kD, 10 kD, 15 kD, 25 kD 至 50 kD，讓透析變得”細緻化”，而不是一般所認知的約略值 ( 詳細規格可參閱 "欣梗-RC-S" 或 "SpectrumLabs-RC-S" )。
而為滿足生物科技產業對高回收率的要求，發展出相較於RC膜更低蛋白吸附與對膜孔洞(MWCO)專一性高的CE膜。CE膜對蛋白質幾乎無Binding問題，且分子量 (MWCO) 專一度極佳。因此唯有此款 CE材質才能因應高回收率與”高精緻度”的要求，其對分子量的選擇範圍更為寬廣，由100-500D, 500-1000D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD, 100 kD, 300 kD 至 1000 kD (詳細規格可參閱 "欣梗-CE" 或 "SpectrumLabs-CE" )。
因此一般泛用型可選擇 RC 膜，對於回收率有極高要求的樣品，如非常稀少珍貴或進行藥物釋放實驗，則建議選用 CE 膜。
Micro Float-A-Lyzer (超微量型透析管 for < 1ml)
詳細規格可參閱 "欣梗-FAL" or "SpectrumLabs-FAL"
操作與處理微量樣品之透析極其不易。SpectrumLabs因應此問題，提供二款特殊設計透析膜，其容量分別是100-200 µl 與400-500 µl。加上樣品體積量少，因此高回收率則變得極為重要。此款透析膜採用CE膜，外加其特殊扁瓶設計，讓樣品與透析液接觸面積增加，強化透析效率。亦因此特殊設計，可輕易的將樣品利用所附的小取樣器，近乎完全被取出，低殘留。
此款其分子量的選擇範圍為100-500 D, 500-1000 D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD與100 kD。
Float-A-Lyzer G2 (便利型透析管for 1~10 ml)
詳細規格可參閱 
"欣梗-G2" or "SpectrumLabs-G2"
透析袋式透析膜，有幾項操作不便之處：
SpectrumLabs 因此發展出一款便利型透析管，完全無需前處理與夾具，只要以pipette取樣將樣品置入於管中，蓋上螺紋蓋，即可放入透析槽內。該透析管上附有浮板，可垂直漂浮於透析槽中；透析管為圓型管柱，可降低樣品稀釋率；而透析過程中可隨時開啟螺紋上蓋，進行取樣檢測。
此款透析管有 1 ml、5 ml與10 ml三種體積，分子量的選擇範圍為100-500 D, 500-1000 D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD與100 kD。
Tube-A-Lyzer (管中管式透析管for >10 ml)
此款透析管有著Float-A-Lyzer G2 (便利型透析管)的所有優點。能微處理較大體積的樣品，採用管中管設計。內管為樣品管，外管則讓透析液流動，讓樣品能持續接觸到新的透析液，增加透析效率，免除透析時需定時更換新透析液的麻煩。
此款透析管有 10ml與30ml二種體積，其分子量的選擇範圍為100-500 D, 500-1000 D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD與100 kD。若處理體積大於10 ml或30 ml時，可採取併聯或串連式銜接，增加處理體積與處理效率。
其他注意事項
一般透析處理時間約16~24小時，但與膜孔徑(MWCO)的選擇，樣品體積，小分子濃度，外部透析液所使用的體積，外部透析液更換頻率與透析液攪拌等等，均可影響到透析時間與效率。
使用者最常讓忽略掉的是透析液的體積與換液頻率此部分因素。外部透析液體積與樣品體積差異愈大，其透析效率則愈高。一般建議比例為 100 ：1。換液頻率至少三次以上，於 2~3 小時後，進行第一次換液。之後4~5小時後進行第二次。最後為離開實驗室前進行第三次，讓其透析一個晚上。
以上訊息均可大大提高樣品透析效率與透析後的精緻度，並降低處理時間。
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