目前分類:Spectrum Lab 中空纖維膜 (7)

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CAR-T病毒10倍濃縮只要30分鐘!

取代離心式濃縮,以Hollow fiber中空纖維膜做切向流(tangential flow/cross flow)濃縮,省時有效率,高達95 % 以上樣品回收率!

mini TFF 切向流過濾系統 MAP.03 sytem

 

MAP.03 mini TFF system.png

 

實驗目的: 將原50 ml含有CAR-T之病毒培養液濃縮至5 ml

實驗方法: 以Spectrum_Repligen hollow fiber (C02-E300-05-N)並搭配迷你幫浦MAP.03做過濾濃縮

20190815_152449.jpg

整組Hollow fiber與連通管路以gamma ray無菌處理並於無菌操作台中操作使用,免去0.22 um過濾除菌!

 

 

  濃縮大車拼
  Hollow fiber 切向流 傳統離心
裝置圖

MAP.03 mini TFF system.JPG

spin column.jpg

原理

樣品流向平行濾膜,不易堵塞

Cross Flow.jpg

樣品流向垂直濾膜,易堵塞

Dead End.jpg

50 cc
10倍濃縮時間
約30 min 需分裝離心 15 cc/tube >1 hr
回收率 >95 % 易沾黏在膜上,回收率較差

 

迷你輕巧! 冰箱中4度C 自動操作、自動停機也OK!!

20190816_105845.jpg

 

 

若有更多濃縮透析問題,歡迎於部落格留言與我們討論,或參考

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Tel: 02-28321066
E-mail: info@lefoscience.com

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Hollow Fiber.jpg

氧化鐵奈米粒子在奈米材料中廣為人知,其中四氧化三鐵(Fe3O4)為已知的生物相容材料,使用在生醫方面快40年了,也被允許用在人體方面。四氧化三鐵磁性奈米粒子有可溶水和可進入細微組織的特性,其常見的製作方法主要為共沉澱法(水相)熱分解法(有機相)。在生物醫學應用的必要條件必須有(1)無生物毒性、(2)水溶性、(3)生物相容性等等,才可符合生醫應用。

四氧化三鐵奈米粒子的生醫應用多元化,最特別的就是與本身磁性性質有關的溫熱治療和藥物磁性導引治療。例如有一隻老鼠背部有一顆腫瘤,我們將磁性奈米粒子從尾巴注射進去,並在腫瘤位置周遭放置磁鐵,即可達成藥物導引於腫瘤處治療,而磁性奈米粒子在外加磁場狀態下,會吸收交流磁場能量,使其在原地旋轉產生熱,進而讓周遭的液體溫度上升。由於人體正常細胞與癌細胞對溫度的耐受度不一樣,人體正常細胞耐熱度為攝氏43 ~ 45度之間,而癌細胞耐熱度大概是攝氏42度。熱治療的概念,就是把溫度提高到癌細胞無法承受的溫度,而人體正常細胞還可以忍受,此時癌細胞就會開始死亡,當維持此溫度一段時間,癌細胞就有機會死光,達到治療的目的。(Source : 鄭豐裕 | 成功大學口腔醫學研究所助理教授 https://scitechvista.nat.gov.tw/c/sBXU.htm )

 

  傳統方式 : 

製備多以沉澱法製作,製備完成後之樣品處於極酸溶液,需採用透析法將pH值調節至貼近中性。至少需 2天2夜進行透析耗時且費事

dialysis.jpg

 

  最新方法 : 

Hollow fiber 中空纖維膜-切向流,快速濃縮透析系統 桌上簡易型! 

Lefoscience 欣梗 MAP 濃縮分離透析.png

 

原液.jpg

50 分鐘後, 即可達 10x 濃縮並透析,完成離子分離換液

process.jpg

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利用 SpectrumLabs KR2i 快速完成奈米濃縮 (nanopartical concentraion)

 

KR2i TFF.png

 

  奈米溶液

奈米 酒精 溶液.png

 

  利用 SpectrumLabs Cross Flow 進行奈米粒子濃縮

奈米 濃縮.png

 

  40 分鐘後, 即可達 12x 濃縮

奈米 濃縮液-01.png

           

    離心乾燥處理 

奈米 濃縮液-03.png

 

 

更多資訊,歡迎參考欣梗科技股份有限公司網站

Tel: 02-28726874

E-mail: info@lefoscience.com 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                    

 

 

 

 

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Kros flo 2 為濃縮透析的好朋友,省時,效率高!! 

此實驗目的為在無菌操作情況下利用MidiKros Hollow fiber來探討病毒濃縮的效率與表現(操作過程如下圖)。原是樣品200 ml濃縮至5 ml(250X), 再經換液透析至20 ml全程僅花35分鐘。利用中空纖維膜搭配kros flo 2,以高流速,低TMP方式進行濃縮病毒,可減少對樣品的傷害、花費時間非常短之外、最重要是如文獻所言,可以將樣品濃縮至相當低體積量,範圍在1 ml-5 ml內

樣品種類:Adenovirus 腺病毒

Adenovirus 腺病毒.jpg

出處: http://en.vircell.com/diseases/5-adenovirus/

 

中空纖維膜 (Hollow Fiber)  之規格:D02-E100-05-N , 100 kD,SA=115 cm2

Midikros D02-E100-05-N.jpg

實驗流程:濃縮 --> 換液 --> 回收 --> 測titer數

高倍濃縮透析系統Kros flo 2.png

架設軟體-->收集數據 --> 分析提供報告

無菌操作濃縮透析.jpg

結果:整體實驗測得titer數為 (濃縮前) 8.55X10^7 --> (濃縮後) 5.92X10^8

 

更多資訊,歡迎聯絡我們欣梗科技!!

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Hollow fiber 與Kros Flo 2搭配超讚!! 僅用5小時完成8L的細胞濃縮分離!!

此實驗目的為利用mPES MicroKros Hollow fiber來進行大腸桿菌(E.coli)細胞碎片(Cell Debris)分離。原是8000ml濃縮分離至600ml (100X),僅花5小時!再來~經測試後,蛋白質殘餘量只剩不到10%。此系統與過去傳統Cassette比較,不旦降低Gel Layer的形成以提升分離效率,而且花費在實驗上的時間減少,且大幅度提升試驗成功機率!!另外這次完全自動化控制與紀錄數據,如:壓力控制、壓差計算、通透率等等唷!!何樂而不為!!

Kros Flo 2 with software 細胞濃縮分離系統.jpg

中空纖維膜(Hollow fiber)規格

型號:04-E500-10-N 500kD 膜面積:1000cm2

S04-E500-10-N mPES hollow fiber.png

分離系統使用  (這是Spectrum Labs 公司推出最新款的系統!! 更完善方便!!)

Kros Flo 2 ii 壓差 壓力 控制.png

操作過程

相當簡單!設備啟動後,將樣品進行4次濃縮清洗,然後回收過濾段的液體為本試驗的目標。最後測試有多少量的蛋白質殘留在回流端作為試驗效率的指標。殘餘量越低,代表效率越高~

若想要知道更多Kros Flo 2與Hollow fiber的成果與資料,請繼續追蹤LEFO FB/部落格或與我們聯絡,讓我們知道您們的需求!

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一小時內搞定 50 ml蛋白質溶液10倍濃縮? MAP系統為你解決!!   

這次主要帶大家看看MicroKros Hollow fiberMAP系統搭配如何進行細菌蛋白質之濃縮試驗與其表現。原樣品50 ml濃縮至5.0 ml10x),所花的時間少於1.0小時且殘留幾乎為零。此系統操作簡單省時不須經過複雜組裝即可在短時間內自動化完成蛋白質濃縮。

濃縮系統使用:

MAP SYSTEM (濃縮、分離、透析、過濾,尤其少量樣品時更合適)

MAP 分離濃縮系透析.png

 

操作過程與結果:

1. 濃縮過程-操作超級簡單,只要將樣品瓶與Hollow fiber接上按啟動即可開始濃縮,將樣品50cc濃縮至5cc左右僅花<1小時 !!

MAP系統蛋白濃縮前後.png

 

2. Bradford test (粗略測試)-蛋白確實有持續濃縮中 (濃縮有成功!!)

Brafford test 蛋白濃度測試.jpg

 

透析膜 (Hollow fiber)  之規格:

C02-E100-05-N  100 kD, SA=20cm2 

 

Hollow fiber 中空纖維膜.jpg

MAP系統詳細介紹,請參考:  http://www.lefoscience.com/product/view/166

Hollow fiber 中空纖維膜 : https://reurl.cc/3AAoV

 

 

若樣品體積容量少且害怕殘留問題,歡迎留言洽詢

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Lefoscience spectrumlab .png

快速病毒濃縮(無菌操作)的新思維   

此實驗目的為在無菌操作情況下利用MicroKros Hollow fiber來探討病毒濃縮的效率與表現(操作過程如下圖)。原樣品8000 ml濃縮至200 ml(40X),僅需花1.5小時。所以利用Hollow fiber中空纖維膜,以高流速,低TMP方式進行濃縮病毒,可減少對樣品的傷害、達到無菌效果且花費在濃縮的時間大幅度降低

原始處理之樣品8000 ml,內容物包含:1.  病毒 (80 nm)  ;   2. 培養基 (Buffer and medium)

透析膜 (Hollow fiber)  之規格:

S04-E-100-05-N 100 kD,SA=1600 cm2 

Hollow fiber S04-E-100-05-N.png

 

濃縮系統使用:

 

Spectrum lab Kros Flo 2 (分離、濃縮、過濾)

分離過濾Kros flo 2.png

影片介紹: https://vimeo.com/332536347

 

操作過程:

 

操作如下!  相當簡單,將樣品8000ml進行濃縮至200ml左右(濃縮40X),整個過程僅需花1.5小時。

無菌操作病毒濃縮.png

補充:

其系統不旦可以做濃縮試驗,也具備分離過濾的功能。

 

若更多的資訊或任何問題,歡迎留言或聯絡 

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