提高微生物培養量的一些小訣竅
實驗室中常利用培養瓶培養細胞和微生物,而研究人員們該如何提高培養瓶的產量呢?

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INFORS HT shaking incubator 最人
INFORS HT Multitron & Minitron shaking incubator 震盪培養箱
專為懸浮式細胞(Cells)、微生物(Microorganisms)、光合生物(Phototrophic organisms)
培養設計之震盪培養箱

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KR2i TFF 全自動濃縮透析系統with KONDUiT.jpg
KrosFlo® KR2i TFF System 切向流濃縮透析系統
實現真正全自動化濃縮、透析、純化、補液系統
 

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SpectraFlo dialysis system2.JPG
SpectraFlo™ Dynamic Dialysis Systems 動態透析系統
大體積的溫和透析法~

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MAP.03 mini TFF system.png
CAR-T病毒10倍濃縮只要30分鐘!
取代離心式濃縮,以Hollow fiber中空纖維膜做切向流(tangential flow/cross flow)濃縮,省時有效率,高達95 % 以上樣品回收率!

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electroporation.jpg
  之前從CAR-T製程過程,從細菌到病毒 (上篇)已介紹含有專一性辨認之基因片段的質體(plasmid)是如何透過細菌複製增量,接下來就是將質體送入T細胞中最終使其表現CAR於細胞表面上,送入方式常見的有電穿孔(electroporation)與病毒感染(virus infection),前者是在細胞外外加短暫高電壓,使細胞膜通透力暫時性增加來讓外源基因進入細胞中,而本篇將著重於病毒感染法來介紹。
 

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Process of gene cloning and E-coli collection, clarification %26; concentration  .jpg
在先前的文章:Hollow Fiber製備CAR-T載體與品質的檢測中,我們介紹到CAR-T的原理與應用,但在使用慢病毒感染T-cell改造成CAR-T前是需要進行重重步驟,本篇將跟各位介紹具有目標基因的病毒是如何被製造,過程又大致可分為細菌培養放大質體(Plasmid)與哺乳細胞培養放大慢病毒(ex: Lentivirus),放大慢病毒的部分將在下一篇再跟大家介紹。簡易的細菌放大步驟圖如下:
 

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RAPID CLEAR® CAP 3000
Rapid clear cap 3000.jpg

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Configuration of hollow fiber cartridges and flat sheet cassettes.JPG
Picture resource from GE healthcare handbook

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cross flow.jpg

 

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敲開膜界的另一選擇 : 捲式膜應用於換液與濃縮

捲式膜運作基礎

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Hollow Fiber.jpg

  Hollow Fiber

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