講求透析高回收率時,常常被忽略掉因素與方法

Dialysis Tubing.jpg

透析膜一是種半透膜,高濃度的小分子經由半透膜,往低濃度擴散,直至二端濃度達至平衡。進而再次更換新的外部透析液,繼續進行透析。持續幾次此步驟,即可將樣品小分子全數被透析出。因此透析膜的材質透析膜孔徑的精細度影響透析效率甚巨。

CE (Cellulose Ester)

蛋白質對於膜的Binding程度為 CE < RC。而膜孔徑的專一性則為 CE > RC

CE Dialysis-01.jpg

透析膜一般最廣為人知的材質是RC (Regenerated Cellulose),傳統的分子量(MWCO)可選擇範圍是 3.56~8 12~14kD (詳細規格可參閱      "欣梗-RC膜" "SpectrumLabs-RC" )

隨著材料科技發展,SpectrumLabs研發出讓 RC 膜的分子量(MWCO)可選擇性更多樣化,由1 kD, 2 kD, 3.5 kD, 8 kD, 10 kD, 15 kD, 25 kD 50 kD,讓透析變得細緻化,而不是一般所認知的大約大約…. ( 詳細規格可參閱    "欣梗-RC-S" "SpectrumLabs-RC-S" )

但這些發展似乎仍無法滿足生物科技的高回收率之要求,其最重要關鍵因素在於蛋白質本身與膜的Binding的因子與分子量 (MWCO) 的專一度。CE膜對蛋白質幾乎無Binding的問題,且分子量 (MWCO) 專一度極佳。因此唯有此款 CE材質才能因應高回收率與高精緻度的要求,其分子量的選擇範圍則更為寬廣,由100-500D, 500-1000D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD, 100 kD, 300 kD 1000 kD (詳細規格可參閱   "欣梗-CE""SpectrumLabs-CE" )

因此一般泛用型可選擇 RC 膜,但對於回收率有極高要求的樣品,如非常珍貴或進行藥物釋放實驗,則建議可選用 CE 膜。

 

Micro Float-A-Lyzer (超微量型透析管 for < 1ml)

Micro Float-A-Lyzer-01.jpg 詳細規格可參閱  "欣梗-FAL" or "SpectrumLabs-FAL"

操作與處理非常微量樣品,是最不容易且非常費事的事。SpectrumLabs因應此一問題,提供二款特殊設計透析膜,其容量分別是100-200 µl 400-500 µl。由於樣品體積量少,因此回收率則變得極為重要。此款透析膜採用CE膜,外加其特殊扁瓶設計,讓樣品與透析液接觸面積增加,強化透析效率。亦因此特殊設計,可輕易的將樣品利用所附的小取樣器,完完全全被取出,無任何殘留。

Micro Float-A-Lyzer-02.jpg

此款其分子量的選擇範圍為100-500D, 500-1000D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD100 kD

 

Float-A-Lyzer G2 (便利型透析管for 1~10 ml)

Float-A-Lyzer G2-02.jpg 詳細規格可參閱  "欣梗-G2" or "SpectrumLabs-G2"

透析袋式透析膜,有幾項操作不便之處:

  1. 需使雙夾具,而夾具的位置/方式不適當,樣品極易因此於透析過程中滲漏。因此操作上須非常謹慎。
  2. 謹慎夾妥後之透析袋置於透析槽中,常常是載浮載沉,不易固定,影響透析效率。
  3. 另一比較大問題是無法於中途採樣。
  4. 透析帶為軟性材質,於透析過程中,樣品容易被稀釋。

Float-A-Lyzer G2-04.jpg

Float-A-Lyzer G2-03.jpg

SpectrumLabs 因此法展出一款便利型透析管,完全無需錢處理與夾具,只要以pipette將樣品置入於管中,蓋上螺紋蓋,即可放入透析槽內。該透析管設計有一浮板,可將透析管垂直式漂浮於透析槽中。且透析管為圓型管柱,稀釋得問題得以被降低。而於過程中,隨時可輕易開啟螺紋上蓋,進行取樣檢測。

Float-A-Lyzer G2-01.jpg

此款透析管有 1ml5ml10ml三種體積,其分子量的選擇範圍為100-500D, 500-1000D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD100 kD

 

Tube-A-Lyzer (管中管式透析管for >10 ml)

Tube-A-Lyzer-01.jpg 詳細規格可參閱   "欣梗-TAL" or "SpectrumLabs-TAL"

此款透析管有著Float-A-Lyzer G2 (便利型透析管)的所有優點。因為此款透析管微處理較大體積,採用管中管設計。內管為樣品管,而外管則讓透析液流動,讓樣品能持續接觸到新的透析液,增加透析效率,免除於透析時需定時更換新透析液的麻煩。

Tube-A-Lyzer-02.jpg

此款透析管有 10ml30ml二種體積,其分子量的選擇範圍為100-500D, 500-1000D, 3.5-5 kD, 8-10 kD, 20 kD, 50 kD100 kD。若處理體積大於10ml30ml時,可採取併聯或串連式銜接,增加處理體積。

 

其他注意事項

一般透析約16~24小時可完成,但與膜孔徑(MWCO)的選擇,樣品體積,小分子濃度,外部透析液所使用的體積,外部透析液更換頻率與透析液攪拌等等,均可影響到透析時間與效率。

使用者最常讓忽略掉的是透析液的體積與換液頻率此部分因素。外部透析液體積與樣品體積差異愈大,其透析效率則愈高。一般建議比例為 100 1。換液頻率至少三次以上,於 2~3 小時後,進行第一次換液。之後4~5小時後進行第二次。最後為離開實驗室前進行第三次,讓其透析一個晚上。

以上訊息均可大大提高樣品透析效率與透析後的精緻度,並將低處理時間。

 

For More Detail, please contact as follows:

 欣梗科技股份有限公司

      www.lefoscience.com

      TEL: 02-28726874 

      e-mail: info@lefoscience.com

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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二氧化碳培養箱專用之振盪器

全世界最扁的振盪器

001.jpg

它的好...看看影片應該就知道...小編在此就無需多做贅述囉!

 

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      e-mail: info@lefoscience.com

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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培養細胞最常見的問題是:「細胞量與產物不理想」與「二氧化碳培養箱不夠用」…….

Optimum Flask-Infors.jpg

 

Thomson Optimum Flask可為您解決以上問題 ----

Thomson Optimum Flask的瓶身有獨特的設計,培養效率增加;同時培養體積加倍。培養體積可提升為其他同等規格培養瓶的 2~3 倍以上。

Thomson Flask-01.jpg


相關規格一應具全

Thomson Flask-02.jpg


與它牌做比較

CASE 1 :     HEK 293 產物產量差異極大

Thomson Flask-04.jpg

 

CASE 2 :   使用250 ml Thomson Flask培養所得的產物量與它牌使用500 ml的結果是一樣的

Thomson Flask-05.jpg


    最新設計,可不需先蓋"取樣","添加培養基"與"轉殖放大" 

Thomson Flask-06.jpg

Thomson Flask-07.jpg


更多資訊         Thomson Flask-08.jpg

 

 

 

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利用 SpectrumLabs KR2i 快速完成奈米濃縮

(更多資訊,歡迎聯絡我們欣梗科技!!)

KR2i TFF.png

 

  奈米溶液

奈米 酒精 溶液.png

 

  利用 SpectrumLabs Cross Flow 進行奈米粒子濃縮

奈米 濃縮.png

 

  40 分鐘後, 即可達 12x 濃縮

奈米 濃縮液-01.png

           

    離心乾燥處理 

奈米 濃縮液-03.png

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                    

 

 

 

 

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冷颼颼的天氣,大家都去哪裡跨年呢?

欣梗科技祝各位新的一年,新年快樂,平安幸福!

圖片來源:http://www.123newyear.com/wp-content/uploads/2015/03/new-year-messages-and-sms.jpg

Happy new year 新年快樂.png

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Kros flo 2 為濃縮透析的好朋友,省時,效率高!! 

此實驗目的為在無菌操作情況下利用MidiKros Hollow fiber來探討病毒濃縮的效率與表現(操作過程如下圖)。原是樣品200ml濃縮至5ml(250X), 再經換液透析至20ml全程僅花35分鐘。利用中空纖維膜搭配kros flo 2,以高流速,低TMP方式進行濃縮病毒,可減少對樣品的傷害、花費時間非常短之外、最重要是如文獻所言,可以將樣品濃縮至相當低體積量,範圍在1ml-5ml內

樣品種類:Adenovirus 腺病毒

Adenovirus 腺病毒.jpg

出處: http://en.vircell.com/diseases/5-adenovirus/

 

中空纖維膜 (Hollow Fiber)  之規格:D02-E100-05-N , 100 kD,SA=115cm2

Midikros D02-E100-05-N.jpg

實驗流程:濃縮 --> 換液 --> 回收 --> 測titer數

高倍濃縮透析系統Kros flo 2.png

架設軟體-->收集數據 --> 分析提供報告

無菌操作濃縮透析.jpg

結果:整體實驗測得titer數為 (濃縮前) 8.55X10^7 --> (濃縮後) 5.92X10^8

 

更多資訊,歡迎聯絡我們欣梗科技!!

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發酵槽操作複雜困難? 專屬研究與教學使用的Minifors2!!

看似複雜完整的系統,但操作上非常簡單,此系統非常適合應用在小型研究與教學示範。為了輕便且高效率,設計上採用Heating block達到保溫功能。貼心設計置藥瓶架與玻璃槽相連,只要一手拿起即可滅菌,讓發酵滅菌過程安全且簡單化。配合各種實驗需求,有三種可互換的玻璃槽,分別是1.5L, 3.0L, 6.0L。另特色為數位式pH與DO sensor,不用再為校正而煩惱與等待。除此之外,該系統採用數位觸控面板,再搭配eve系統可選擇各種的發酵模式操作且能利用USB存取各種數據以做分析。從以上結論下來,它乃是發酵入門款且進入大型發酵前必備的系統呀!

Minifors 2  發酵槽 INFORS LEFO.jpg

一體成型外觀!!!

Minifors 2  發酵槽 Vessel.jpg

玻璃槽沒有與底座連結,可隨時更換各種體積的玻璃槽~

0.5L 1.5L 6L Minifors 2.jpg

Minifors 2 pH meter 與 DO sensor .jpg

不需要再矯正DO sensor 與pH meter

Minifors 2 可拆式幫浦.jpg

可拆式可滅菌之peristaltic pump (幫浦)


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2.5L Thomson Ultra Yield 搖瓶終於有帽子可以戴了!! 

可滅菌、可重複使用!! 降低操作過程的污染機率!!

Ultra yield vented cap 2.5L.png

原廠資訊: Thomson instrutment company

心動了嗎?更多資訊,歡迎聯絡我們欣梗科技!!

 

 

 

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哇!! MAP系統~僅花8分鐘細胞濃縮完畢且恢復力8成以上!!

此實驗目的為利用D系列mPES Microkros Hollow fiber來進行草履蟲(Paramecium)細胞濃縮。原液為50ml濃縮至5ml (10x)僅花8分鐘而已!!使用MAP系統濃縮不旦省下許多時間,草履蟲細胞的恢復力高達8成以上。所以利用Hollow fiber中空纖維膜,以高流速,低TMP方式進行原生動物細胞濃縮, 可減少對樣品的傷害且花費的時間大幅度降低。

也就是說,當進行量產實驗5000ml時,僅需半天時間即可完成!

Paramecium 草履蟲 原生動物 濃縮.jpg

http://www.dfiles.me/paramecium-slide-400x.html

透析膜規格:

D02-E750-050-N, 750kD

mPES MidiKros Filters hollow fiber

濃縮系統使用:

MAP 系統 原生動物.png

有細菌細胞、原生動物細胞濃縮分離的需求?? 歡迎留言或聯絡我們欣梗科技股份有限公司

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Hollow fiber 與Kros Flo 2搭配超讚!! 僅用5小時完成8L的細胞濃縮分離!!

此實驗目的為利用mPES MicroKros Hollow fiber來進行大腸桿菌(E.coli)細胞碎片(Cell Debris)分離。原是8000ml濃縮分離至600ml (100X),僅花5小時!再來~經測試後,蛋白質殘餘量只剩不到10%。此系統與過去傳統Cassette比較,不旦降低Gel Layer的形成以提升分離效率,而且花費在實驗上的時間減少,且大幅度提升試驗成功機率!!另外這次完全自動化控制與紀錄數據,如:壓力控制、壓差計算、通透率等等唷!!何樂而不為!!

Kros Flo 2 with software 細胞濃縮分離系統.jpg

中空纖維膜(Hollow fiber)規格

型號:04-E500-10-N 500kD 膜面積:1000cm2

S04-E500-10-N mPES hollow fiber.png

分離系統使用  (這是Spectrum Labs 公司推出最新款的系統!! 更完善方便!!)

Kros Flo 2 ii 壓差 壓力 控制.png

操作過程

相當簡單!設備啟動後,將樣品進行4次濃縮清洗,然後回收過濾段的液體為本試驗的目標。最後測試有多少量的蛋白質殘留在回流端作為試驗效率的指標。殘餘量越低,代表效率越高~

若想要知道更多Kros Flo 2與Hollow fiber的成果與資料,請繼續追蹤LEFO FB/部落格或與我們聯絡,讓我們知道您們的需求!

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